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临床基因实验室探秘甲流确诊全过程

 

 


 

医院PCR实验室探秘甲流确诊全过程
 


经过一系列检测,用电脑分析结果得出检测结论

    9月23日晚9点,云南省传染病医院副院长李惠琴才下班,因为从中午开始,几名孩子家长非要等到安宁市疾控中心的工作人员来才让她离开。

    云南省感染病学会委员、传染病副主任医师……拥有传染病方面诸多头衔的李惠琴本该在病房中会诊,而如今不得不面对家长的不理解以及甲流咽拭子采样环节上的种种限制。

    “如果医院有试剂,我们就可以在病人临床症状消失三天后马上检测,而且24小时肯定能出结果,就不会有这样的困扰了。”李惠琴说。昆明市第三人民医院相关领导也认为,第二波甲流来袭,防控形势已经变化,下放试剂不仅可以缩短病人住院时间,还可以更及时有效地隔离感染者。

    云南省传染病医院院长樊移山前天表示,省卫生厅已经对该院的咽拭子样本化验进行了批复,确定该院酶联聚合反应实验室(PCR)可以化验咽拭子样本。咽拭子样本需要经过怎样的化验才能判断是阴性还是阳性呢?记者走进PCR,探秘甲流确诊过程。

    第一步:

    咽拭子样本从传递窗进到实验室

    省传染病医院的PCR设在门诊住院楼的二层,PCR门口一个个国字号认证的牌子非常鲜亮。

    要进PCR,必须穿上鞋套,换上干净的白大褂。“实验室里不能带进任何灰尘,而且属于万级洁净单位的实验室,现在能化验HCV(丙肝)、HBV(乙肝)、HIV(艾滋病)三种病毒。化验甲流病毒,对我们来说只是多了一种病毒而已。”副院长李惠琴说。

    在实验室的物品准备间门外,还空着一间大房子。“这间完全可以做甲流病毒的化验室。”李惠琴说。从物品准备间看过去,一条红色的污染通道和PCR中的淡绿色地板形成明显反差,咽拭子样本就需要从污染通道进到实验室。

    甲流病毒定植在人的呼吸黏膜上,通过淋巴系统不断复制,再释放到血液中让病人出现发热、咽痛、流涕等症状,咽喉部位的取样能准确地把病毒取出来。

    咽拭子样本送进实验室后,工作人员会将棉签上的附着物尽量多地冲到试管里,甲流病毒就隐藏在这些附着物中。因为病毒都被硬硬的外壳包裹着,所以只有提取到核酸,才能准确地判断出患者的症状是否是由甲流病毒引起的。

    在试管内加入裂解液(专门攻击病毒硬壳的试剂)后,病毒的核酸就暴露出来了。为了得到更多的病毒以供实验,在高速离心机分离核酸和其他物质前,试管还需要在每分钟3000次的震荡仪上强烈振动。

    第二步:

    PCR室内“把蚂蚁变成大象”

    把“蚂蚁”变成“大象”,这需要在PCR室中完成。“从制样室内制成的甲流病毒核酸片段送来后,在这里可以被以10的8次方左右的数量级放大,在这里我们把‘蚂蚁’变成‘大象’然后进行测定。”李惠琴说。PCR扩增仪上,增加不同种类的病毒会呈现不同的曲线,但没有感染甲流病毒者则呈现一条直线。

    分型室内,专家们能根据这些被复制的核酸鉴别出病毒类型。“前面的工作就像是我们拿到一片树叶,不知道到树的名称。但如果把这片树叶培养成植株的话,一眼就明白是什么树。”李惠琴说。因为没有试剂,在PCR完全可以胜任的工作,只能全部交由疾控部门完成。

    这个在全省医院系统唯一一家有HIV确诊资格的实验室,是否能在抗击甲流的过程中发挥作用,李惠琴在等待。

    “如果能下放试剂,甲流患者最少也可以提前一天出院。”李惠琴表示,在云南,三四家医院都可以做确诊甲流病毒的实验。在下放试剂之前,硬件设施已经到位,工作人员都是熟手,只要在试剂使用方面开展相关培训即可。
 
 


 

 
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